Beurteilende(r)| Name: | Ao.Univ.Prof. Dipl.-Ing. Dr.nat.techn. Erika Staudacher |
| Herkunftsbetrieb: | |
| Arbeit |
| Typ der Arbeit: | Masterarbeit |
| Sprache der Arbeit: | Deutsch |
| Titel der Arbeit in Originalsprache: | N-Glykananalyse in Gastropoden |
| Titel der Arbeit in deutsch: | N-Glykananalyse in Gastropoden |
| Titel der Arbeit in englisch: | N-glycan analysis in gastropods |
| Publikationsmonat: | 03.2007 |
| Seitenanzahl: | 113 |
| Volltext |
| Volltext der Arbeit: | Volltext der Arbeit im PDF-Format laden |
| Online-Katalog der Universitätsbibliothek Bodenkultur |
| AC-Nummer: | AC05903409 |
| Abstract |
| Abstract in Deutsch: | Im Rahmen dieser Diplomarbeit wurden die Glykanstrukturen von insgesamt 7 Schneckenarten untersucht, darunter Nackt-, Gehäuse-, Land- und Wasserschnecken, sowie - wo verfügbar - auch Zellkulturen und Eier. Die Glykoproteine wurden proteolytisch verdaut, anschließend die N-Glykane mittels Glykopeptidase freigesetzt und fluoreszenzmarkiert. Weitere Präparationsschritte wurden mittels HPLC durchgeführt. Ein Teil der N-Glykane wurde für Monosaccharidanalysen herangezogen. Dabei konnten in allen untersuchten Proben Xylose, Fukose und methylierte Galaktose nachgewiesen werden. Durch Analyse der Glykoproteine mittels Western-Blot und Lektin-Detektion wurden in vielen Schnecken endständig sialylierte Glykanstrukturen nachgewiesen. In Planobarius corneus konnten N-glykosidisch gebundene, sialylierte Strukturen durch enzymatische Abbauten mit Sialidase und PNGase F bestätigt werden. Mit Hilfe von MALDI-TOF-MS, sowie Endo- und Exoglykosidaseabbauten konnten Informationen über die Glykane in Zellen von Biomphalaria glabrata und in Eiern von Achatina fulica gewonnen werden. Erstere wiesen vor allem hoch- und paucimannosidische Glykanstrukturen auf, die zum Teil auch in methylierter Form vorlagen. Zweitere zeichneten sich durch teilweise fukosylierte komplexe N-Glykanstrukturen aus, die endständig negative Ladungen tragen, die vermutlich auf Sulfatreste und/oder Sialinsäuren zurückzuführen sind. Es konnte gezeigt werden, dass Schnecken ein weites Spektrum an Glykosylierungsmöglichkeiten besitzen, was sie zu interessanten Forschungsobjekten auf dem Sektor der Glykobiologie macht. |
| Abstract in Englisch: | The aim of this work was the expansion of knowledge about the N-glycosylation potential of different snails. Slugs, shell-, land- and watersnails and - if available - eggs and cell cultures have been analysed. Proteolytic digestion of glycoproteins was performed, N-glycans were released by enzymatic digestion using glycopeptidase and afterwards labelled with fluorescent groups. Further preparation steps were done by HPLC. One part of the N-glycans could be used for monosaccharide-analysis. It was shown that all samples contained xylose, fucose and methylated galactose. Undigested glycoproteins were assayed by Western blot with lectin detection. A large part of the analysed snails were identified to contain terminal sialylated glycoproteins. For Planobarius corneus N-glycosidic and sialylated structures could be verified by enzymatic digestion using sialidase and PNGase F. By MALDI-TOF-MS, exo- and endoglycosidase digests information about glycan structures of cells of Biomphalaria glabrata and eggs of Achatina fulica could be revealed. The former showed predominantly high- and paucimannosidic structures, partially methylated. The latter could be characterised by partially fucosylated complex-type N-glycans with terminal negative charge, presumably derived from sulfate groups and/or sialic acids. It could be shown that snails contain a large variaty of glycosylation abilities. This property makes them interesting model organisms in the field of glycobiology. |
| Schlagworte |
| Schlagwörter Deutsch: | N-Glykane, Glykoproteine, Gastropoden, Sialinsäuren |
| Schlagwörter Englisch: | N-glycans, glycoproteins, gastropods, sialic acids |
| Sonstiges |
| Signatur: | D-12876 |
| Organisationseinheit, auf der die Arbeit eingereicht wird: | H77200 Institut für Biochemie (DCH/BC) |
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